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兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū)
以下是兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒的實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū),綜合相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)參數和操作規范整理:
BS-4221 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 天津本生
一、試劑盒組成
預包被板?:96孔或48孔(抗兔FⅡ抗體包被)
標準品?:6-7管凍干粉(濃度梯度:0.5-16 μmol/L)
檢測抗體?:HRP標記的抗兔FⅡ多克隆抗體
樣本稀釋液?、20×洗滌緩沖液
顯色底物?(TMB A/B)、終止液(2M硫酸)
封板膜?、說(shuō)明書(shū)等耗材
二、樣本處理要求
血清/血漿?:
全血采集后室溫靜置1-2小時(shí),4℃離心(3000 rpm,20分鐘)取上清
避免使用溶血或高脂血樣本,短期保存于-20℃,長(cháng)期需-80℃凍存
組織勻漿?:
按1:9(重量:體積)加入PBS勻漿,離心后取上清檢測
三、實(shí)驗步驟(雙抗體夾心法)
標準品復溶?:每管加200 μL稀釋液溶解,梯度稀釋為1/2~1/64濃度系列
加樣孵育?:
標準孔:直接加50 μL標準品
樣本孔:先加10 μL樣本,再加40 μL稀釋液(5倍稀釋)
37℃孵育60分鐘,洗板5次(手工沖洗或洗板機)
顯色與檢測?:
每孔加TMB底物50 μL,避光顯色15分鐘
加終止液后15分鐘內測OD450值
四、注意事項
試劑保存?:未開(kāi)封試劑盒2-8℃保存,復溶后標準品需分裝-20℃凍存
質(zhì)量控制?:
板內變異系數<10%,板間變異系數<15%
建議標準曲線(xiàn)R2≥0.990
干擾規避?:避免使用NaN3防腐劑(抑制HRP活性)
五、結果計算
以標準品濃度為橫坐標、OD值為縱坐標繪制曲線(xiàn),通過(guò)四參數擬合方程計算樣本濃度。若樣本OD值超出標準曲線(xiàn)范圍,需適當稀釋后重測
如需具體產(chǎn)品的完整說(shuō)明書(shū)或代測服務(wù),可聯(lián)系供應商獲取(部分廠(chǎng)商提供免費代測和技術(shù)支持)。
注:以上資料僅供參考,具體請咨詢(xún)技術(shù)老師或品牌供應商。
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