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人T細胞生長(cháng)因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū)
發(fā)布時(shí)間:2025/5/13瀏覽:169次
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  以下是天津本生技術(shù)小編關(guān)于人T細胞生長(cháng)因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒的實(shí)驗使用說(shuō)明綜合整理:

  BS-0292人T細胞生長(cháng)因子-Ⅲ(TCGF-Ⅲ)ELISA試劑盒

  一、實(shí)驗原理

  采用雙抗體夾心法:包被抗體與樣本中TCGF-Ⅲ結合后,再與HRP標記的檢測抗體形成復合物,通過(guò)TMB顯色反應(藍色→黃色)測定OD值,顏色深度與TCGF-Ⅲ濃度呈正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  標準品?:2700ng/L(0.5ml/瓶)

  酶標包被板?:48孔或96孔規格

  檢測抗體?:HRP標記抗體(3ml/48T或6ml/96T)

  底物系統?:顯色劑A/B液各50μL/孔

  終止液?:50μL/孔

  20×洗滌緩沖液?:需1:20稀釋

  三、樣本處理

  血清?:室溫靜置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后離心(1000g, 20分鐘)

  血漿?:EDTA/肝素抗凝,采集后30分鐘內離心(2-8°C, 1000g, 20分鐘)

  細胞上清?:直接離心(1000g, 20分鐘)

  注:避免反復凍融及溶血樣本

  四、操作步驟

  平衡試劑?:取出試劑盒室溫平衡20分鐘

  加樣?:

  標準品孔:50μL梯度標準品

  樣本孔:10μL樣本+40μL稀釋液

  孵育?:加入HRP檢測抗體100μL,37℃孵育60分鐘

  洗滌?:用洗滌液洗板5次,每次靜置1分鐘

  顯色?:每孔加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分鐘

  終止與檢測?:加終止液50μL,15分鐘內測450nm OD值

  五、注意事項

  溫育需嚴格控制時(shí)間與溫度(37±1℃)

  顯色過(guò)淺可延長(cháng)底物孵育時(shí)間

  開(kāi)封后未用完板條需密封保存(4℃+干燥劑)

  推薦做雙份檢測以減少誤差

  六、適用儀器

  酶標儀(450nm)

  精密加樣器(0.5-1000μL范圍)

  如需具體品牌試劑盒(如天正信達生物、天津本生等)的差異說(shuō)明,可進(jìn)一步提供信息,以上資料僅供參考,具體可咨詢(xún)技術(shù)老師或供應商。

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