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以下是關(guān)于大鼠肝微粒體混合功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū)的綜合信息整理:
BS-3491 大鼠肝微粒體混合功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒
一、試劑盒基本參數
檢測原理?:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),在450nm波長(cháng)下測定吸光度值?
規格?:48T/96T(可拆卸孔板)?
保存條件?:2-8℃冷藏,有效期6個(gè)月?
樣本類(lèi)型?:血清、血漿、組織勻漿、細胞上清液等?
二、實(shí)驗前準備
器材準備?:
96孔酶標儀、自動(dòng)洗板機?
移液器及一次性槍頭(建議使用排槍)?
Eppendorf管及干凈塑料容器?
試劑處理?:
使用前將所有試劑平衡至室溫?
標準品需現配現用,稀釋后不可保存?
底物B需避光保存,避免金屬接觸?
三、實(shí)驗步驟
加樣順序?:
按說(shuō)明書(shū)要求依次加入標準品/樣本→生物素標記抗體→HRP標記親和素?
每步驟需嚴格控制溫育時(shí)間和溫度?
洗滌操作?:
使用20×洗滌液配制工作液,洗板后需充分拍干?
避免吸水紙直接接觸反應孔?
顯色與終止?:
底物TMB顯色10-15分鐘,顯色后立即終止?
終止液為酸性溶液,需避免皮膚接觸?
四、注意事項
安全防護?:
操作時(shí)需穿戴實(shí)驗服及手套,避免接觸終止液/底物?
禁止用嘴吸取任何試劑?
質(zhì)量控制?:
板內變異系數<10%,板間變異系數<15%?
回收率需達到85%-115%?
五、數據計算
以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線(xiàn)?
樣本濃度需高于空白對照OD均值+2SD才具統計學(xué)意義?
(注:完整說(shuō)明書(shū)應包含具體濃度梯度、溫育時(shí)間等參數,建議以實(shí)際試劑盒配套說(shuō)明書(shū)為準?)
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