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　　以下是植物6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)ELISA試劑盒的實(shí)驗使用說(shuō)明綜合整理：

　　BS-5024  植物6-磷酸山梨醇脫氫酶(S6PDH)ELISA試劑盒

　　一、試劑盒基本參數

　　規格?：常見(jiàn)為96T/48T兩種包裝?

　　保存條件?：2-8℃避光保存，避免反復凍融?

　　保質(zhì)期?：通常為6個(gè)月?

　　適用樣本?：血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清等生物液體?

　　二、實(shí)驗前準備

　　自備器材?：

　　酶標儀(需支持340nm波長(cháng)檢測)?

　　離心機(8000g能力)?

　　恒溫水浴鍋/培養箱(37℃)?

　　微量移液器及無(wú)菌槍頭?

　　樣本處理?：

　　組織樣本?：按1:10比例(0.1g組織+1mL提取液)冰浴勻漿，8000g離心10min取上清?

　　細胞樣本?：每500萬(wàn)細胞加1mL提取液超聲破碎(功率20%，3s間隔10s，重復30次)?

　　液體樣本?：血清/血漿可直接檢測，避免使用含NaN3的樣本?

　　三、實(shí)驗操作流程

　　試劑配制?：

　　溶解凍干粉試劑(使用前加2mL蒸餾水現配現用)?

　　工作液按試劑一:二:三=110:20:20比例混合?

　　檢測步驟?：

　　酶標儀預熱30分鐘，設置340nm檢測波長(cháng)?

　　每孔加入100μL樣本或標準品?

　　37℃孵育30-60分鐘(具體時(shí)間參考各品牌說(shuō)明書(shū))?

　　洗滌5次后加入底物顯色?

　　四、注意事項

　　避免樣本反復凍融?

　　含NaN3的樣本會(huì )抑制HRP酶活性，需提前處理?

　　建議先做2個(gè)樣本預實(shí)驗優(yōu)化條件?

　　不同物種(人/大鼠/植物等)需確認試劑盒適用性?

　　五、結果計算

　　通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣本中S6PDH濃度，單位通常定義為每分鐘催化生成1nmol NADPH的酶量為1個(gè)活力單位?。具體計算公式需參照試劑盒說(shuō)明書(shū)?。

　　(說(shuō)明：不同品牌試劑盒可能存在操作細節差異，建議以實(shí)際購買(mǎi)產(chǎn)品的說(shuō)明書(shū)為準?)

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