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大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū)
BS-3658 天津本生大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒
大鼠Klotho蛋白(Klotho)ELISA試劑盒的實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū)主要包括以下內容：
1. ?實(shí)驗原理?
該試劑盒采用雙抗體夾心法測定標本中大鼠Klotho蛋白(Klotho)水平。通過(guò)純化的大鼠Klotho蛋白抗體包被微孔板，形成固相抗體，依次加入Klotho蛋白和HRP標記的Klotho蛋白抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。經(jīng)過(guò)洗滌后，加入底物TMB顯色，顏色深淺與樣品中Klotho蛋白含量呈正相關(guān)。最后用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值)，通過(guò)標準曲線(xiàn)計算樣品濃度?。
2. ?試劑盒組成?
30倍濃縮洗滌液：20ml×1瓶
酶標試劑：6ml×1瓶
標準品：2瓶
稀釋液：1×45mL
檢測溶液A：1×120μL
檢測溶液B：1×120μL
TMB底物：1×9mL
終止液：1×6mL
96孔板(預包被)：1塊
96孔板覆膜：2張
使用說(shuō)明書(shū)：1份?。
3. ?樣本處理及要求?
血清?：全血標本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜，1000×g離心20分鐘，取上清，避免反復凍融?。
血漿?：使用EDTA或肝素抗凝，采集后30分鐘內于2-8℃離心，取上清?。
細胞上清液?：3000轉離心10分鐘去除顆粒?。
組織勻漿?：將組織加入適量生理鹽水搗碎，離心后取上清?。
4. ?實(shí)驗步驟?
加樣：標準品及樣本各50μL，37℃孵育30分鐘?。
洗滌：洗板5次，加入酶標試劑50μL，37℃孵育30分鐘?。
顯色：加入顯色液A、B各50μL，37℃孵育15分鐘?。
終止：加入終止液50μL，立即用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度?。
5. ?注意事項?
試劑盒需在2-8℃保存，開(kāi)封后酶標板需密封保存于-20℃?。
實(shí)驗過(guò)程中需避免樣本反復凍融，確保操作環(huán)境溫度、濕度一致?。
試劑盒有效期一般為6個(gè)月至12個(gè)月，具體以標簽為準?。
6. ?適用范圍?
該試劑盒適用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中Klotho蛋白的含量?。
以上內容綜合了多個(gè)來(lái)源的實(shí)驗使用說(shuō)明書(shū)，確保實(shí)驗操作的準確性和可靠性?。
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