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培養皿使用全指南:從滅菌到使用的關(guān)鍵步驟解析
以下是天津本生對培養皿從滅菌到使用的全流程關(guān)鍵步驟解析,綜合實(shí)驗室規范與操作要點(diǎn):
一、滅菌前處理
新培養皿預處理?
熱水沖洗后浸泡1-2%鹽酸溶液6小時(shí),去除游離堿性物質(zhì)
蒸餾水沖洗15次以上,確保無(wú)酸殘留
重復使用培養皿?
立即浸泡防干涸,軟毛刷+中性洗滌劑清潔死角
玻璃培養皿需酸浸過(guò)夜,塑料培養皿建議一次性使用
二、滅菌方法選擇
滅菌方式 參數要求 適用場(chǎng)景
高壓蒸汽? 121℃、30分鐘 細菌培養/常規滅菌
干熱滅菌? 160℃、2小時(shí) 玻璃器皿滅菌
紫外線(xiàn)? 照射≥30分鐘 表面消毒/應急處理
注:滅菌后需倒置存放,防止冷凝水污染
三、無(wú)菌操作規范
培養基灌注?
瓊脂培養基冷卻至45-50℃傾注,厚度3-4mm
液體培養基覆蓋皿底1-2mm,避免氣泡產(chǎn)生
接種技術(shù)要點(diǎn)?
劃線(xiàn)法?:分區劃線(xiàn),每區灼燒接種環(huán)
涂布法?:L型玻棒均勻涂布,菌液量≤0.1ml
倒置培養?:防止冷凝水滴落沖散菌落
四、使用后處理
污染防控?
生物危害樣本需121℃高壓滅菌后再清洗
不同實(shí)驗區域分色標記(如紅色-細菌/藍色-細胞)
存儲條件?
未開(kāi)封培養皿:避光防潮,溫度≤25℃
滅菌后培養皿:密封保存,建議1周內使用
五、常見(jiàn)問(wèn)題解決
培養基干裂?:培養箱內放置水盤(pán)保持濕度>60%
菌落蔓延?:控制接種量,劃線(xiàn)分區不重疊
污染判斷?:異常渾濁/異味需立即終止實(shí)驗
注:所有操作需佩戴無(wú)粉手套,實(shí)驗臺每日紫外消毒30分鐘,以上資料僅供參考,具體請咨詢(xún)技術(shù)老師。
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